1. 协变量文件整理

第一列为FID 第二列为ID 第三列以后为协变量（注意，只能是数字，不能是字符！）

这里协变量文件为：

[dengfei@ny 03_linear_cov]$ head cov.txt 
1061 1061 F 3
1062 1062 M 3
1063 1063 F 3
1064 1064 F 3
1065 1065 F 3
1066 1066 F 3
1067 1067 F 3
1068 1068 M 3
1069 1069 M 3
1070 1070 M 3

这里第三列为性别，第四列为世代，为了方便操作，我们将世代作为数值，直接进行协变量分析

2. 数字协变量

awk '{print $1,$2,$4}' cov.txt >cov1.txt 

数据如下：

1061 1061 3
1062 1062 3
1063 1063 3
1064 1064 3
1065 1065 3
1066 1066 3
1067 1067 3
1068 1068 3
1069 1069 3
1070 1070 3

3. 进行数值协变量GWAS分析LM模型

「代码：」

plink --file b --pheno phe.txt --allow-no-sex --linear --covar cov1.txt --out re

「日志：」

PLINK v1.90b5.3 64-bit (21 Feb 2018)           www.cog-genomics.org/plink/1.9/
(C) 2005-2018 Shaun Purcell, Christopher Chang   GNU General Public License v3
Logging to re.log.
Options in effect:
  --allow-no-sex
  --covar cov1.txt
  --file b
  --linear
  --out re
  --pheno phe.txt

515199 MB RAM detected; reserving 257599 MB for main workspace.
.ped scan complete (for binary autoconversion).
Performing single-pass .bed write (10000 variants, 1500 people).
--file: re-temporary.bed + re-temporary.bim + re-temporary.fam written.
10000 variants loaded from .bim file.
1500 people (0 males, 0 females, 1500 ambiguous) loaded from .fam.
Ambiguous sex IDs written to re.nosex .
1500 phenotype values present after --pheno.
Using 1 thread (no multithreaded calculations invoked).
--covar: 1 covariate loaded.
Before main variant filters, 1500 founders and 0 nonfounders present.
Calculating allele frequencies... done.
10000 variants and 1500 people pass filters and QC.
Phenotype data is quantitative.
Writing linear model association results to re.assoc.linear ... done.

「结果文件：」re.assoc.linear

「结果预览：」

 

这里的结果包括协变量的检验，我们不需要输出协变量结果，可以加上参数：--hide-covar

4. 使用R语言进行结果比较

library(data.table)
geno = fread("c.raw")
geno[1:10,1:10]
phe = fread("phe.txt")
cov = fread("cov.txt")
dd = data.frame(phe$V3,cov$V4,geno[,7:20])
head(dd)
str(dd)
mod_M7 = lm(phe.V3 ~ cov.V4 + M7_1,data=dd)
summary(mod_M7)
mod_M9 = lm(phe.V3 ~ cov.V4 + M9_1,data=dd);summary(mod_M9)

M7加上数值协变量结果：

M9加上数值协变量结果：

结果完全一致。